Metodi e protocolli di decellularizzazione e ricellularizzazione di tessuti biologici

This study was carried out with the group GEMM of the Research Center of the Universidad de Zaragoza, under the supervision of Professor Manuel Doblarè, Dr. Ochoa Iñazio and Dr. Clara Alcaine It has been first defined the experimental set-up and the cannulation method for complex organs, such as heart, liver and lungs, thus obtaining a correct perfusion of the organs with the decellularizing solution. Specific attention has been paid to the esophagus, an organ with a structure simpler than the one of the other organs considered. It has been developed a specific system and an esophageal decellularization protocol, which has been optimized in order to obtain a tissue correctly decellularized. This tissue has been later used as scaffold and recellularized with human mesenchimal stem cells (hMSC).

Questo studio è stato svolto presso il gruppo GEMM del centro di ricerca dell’Universidad de Zaragoza, sotto la supervisione dell’Ing. Manuel Doblarè, del Dott. Iñazio Ochoa e di Clara Alcaine. In un primo momento sono stati messi a punto il set-up sperimentale e il metodo di incannulazione di organi complessi come il cuore, il fegato e i polmoni, che permettano di ottenere una perfusione adeguata degli organi con la soluzione decellularizzante. Ci si è poi soffermati principalmente sull’esofago, organo strutturalmente più semplice rispetto a cuore,fegato e polmoni. È stato messo a punto un sistema e un protocollo di decellularizzazione esofagea. Una volta ottimizzato il protocollo di decellularizzazione e ricavato quindi un tessuto adeguatamente decellularizzato, è stata effettuata una una campagna sperimentale preliminare di ricellularizzazione dello scaffold così ottenuto. I risultati mostrano matrici decellularizzate integre e una parziale adesione di cellule mesenchimali umane seminate sulle matrici decellularizzate.